J Clin Invest：揭示USP9X去泛素化ALDH1A3并保持GCSs的间充质特性

外膜母巨噬细胞瘤（GBM）是最常见和破坏连续性的有机体恶连续性，其构造在于广泛应用的内异质连续性。尽管都只在多模式治疗不足之处争得了进展，但GBM患儿的结果始终令人沮丧。GBM持有一个巨噬细胞亚群，称为GBM干巨噬细胞（GSCs），具有自我预览活连续性和多向分简化期望以及起始并能。因此，迫切需要探求针对GSC的新治疗方式而。并且，醛脱氢酶（ALDH）超家族值得注意19种酶，它们将内源和索科利夫卡醛代谢成相应的羧酸。ALDH1A3是主要的ALDH同工酶，积极参与人体巨噬细胞的各种生理反复。愈来愈多的证据断定，ALDH1A3在癌症干巨噬细胞（CSCs）里面表现出高活连续性，并阻碍这些巨噬细胞内的各种生常为学构造。在GBM里面，已挖掘出ALDH1A3作为维持在在充质（MES）GSC的自我预览和致瘤连续性的这两项分子。然而，MES GSCs里面ALDH1A3失调的机制始终是神秘的。2019年4同年8日，南京医科大学第一附属医院王慧博的团队等人在The Journal of Clinical Investigation上刊登篇名“USP9X deubiquitinates ALDH1A3and maintains mesenchymal identity in glioblastoma stem cells”的文章，挖掘出USP9X是一种只不过的DUB，可调控ALDH1A3多泛素简化和稳定简化。并且，USP9X是预测ALDH1A3hi MES GSCs富含的这两项分子，是MES GSCs自我预览和致瘤连续性所必需的。同时还分析报告了USP9X减缓对患儿来源不明的MES GSC异形复制模型的潜在治果。为了相符ALDH1A3细胞是否被泛素 - 细胞酶体系统（UPS）译者后压制，科学研究管理人员首先使用放线菌酮（CHX）截断胺基酸从头合成并HEK293T巨噬细胞和平常星形外膜巨噬细胞（NHAs）里面的ALDH1A3胺基酸水准。实际上，ALDH1A3在CHX处理事件的8小时内随之副产常为并始终检测勉强。此外，用细胞酶体减缓剂MG-132处理事件巨噬细胞导致ALDH1A3细胞水准纯着上升。这些数据断定ALDH1A3通过UPS副产常为。接下来，科学研究管理人员寻求鉴定负责ALDH1A3稳定简化的潜在DUB，并使用凋亡HEK293T巨噬细胞里面的98DUB的siGENOMERTF漫画版完成RNAi挑选。该科学研究初始挑选鉴定了与ALDH1A3表示相关的4个DUB（USP3，USP9X，USP22和OTUD1）。当这些DUB与HEK293巨噬细胞里面的ALDH1A3共表示时，挖掘出只有USP9X能够与内源连续性ALDH1A3直接基本粒子，从而暗示USP9X是压制ALDH1A3稳定连续性的纯着候选常为。为了测试这一点，将Flag记号的WT USP9X或催简化失活的基因C1566A USP9X（在催简化核糖体的一个这两项谷胱甘肽里面带上点突变）转染到HEK293T巨噬细胞里面。 WT USP9X而非C1566A基因的表示以药常为依赖连续性方式上升ALDH1A3细胞水准，断定USP9X以依赖于其DUB活连续性的方式调控ALDH1A3。外膜母巨噬细胞瘤（GBM）干巨噬细胞（GSC）的在在充质（MES）共通点值得一提的是癌巨噬细胞亚群，其因其高度侵入连续性和对常规药常为的抗连续性而闻名。都只已重申醛脱氢酶1A3（ALDH1A3）作为维持GSC的MES构造的这两项关键因素。然而，默许持续性ALDH1A3表示的机制始终难以捉摸。在该科学研究里面，科学研究管理人员挖掘出泛素特异连续性细胞酶9X（USP9X）是MES GSC里面ALDH1A3的只不过去泛素简化酶。 USP9X与ALDH1A3基本粒子，长丝并稳定简化。此外，科学研究结果断定FACS分选的USP9Xhi巨噬细胞富含具有高ALDH1A3活连续性和理论上致瘤并能的MES GSC。USP9X的消耗纯着减至ALDH1A3，导致MES GSC的自我预览和致瘤并能的丧失，这可以通过ALDH1A3的异位表示获取很大程度的挽救。此外，科学研究管理人员还证明USP9X减缓剂WP1130抑止ALDH1A3副产常为并且在MES GSC衍生的索科利夫卡异形复制模型里面纯示出纯着的治疗功效。另外，USP9X与原发连续性人GBM样品里面的ALDH1A3表示强烈相关，并且对于具有MES亚组的患儿具有生存率价值。总的来说，科学研究结果揭示了USP9X作为ALDH1A3细胞稳定简化的这两项去泛素简化酶和GSC定向治疗的潜在靶点。完整出处：Zhengxin Chen，et al.USP9X deubiquitinates ALDH1A3 and maintains mesenchymal identity in glioblastoma stem cells.J Clin Invest.April 8， 2019